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本发明公开了一种环糊精仿生有机铱磁性催化剂及其制备方法与应用，属于催化剂及应用领域。所述催化剂包括磁性纳米颗粒、β‑环糊精和金刚烷功能化的2‑吡啶苯酰胺型有机铱催化剂三部分；磁性纳米颗粒为表面羧基化磁性纳米颗粒，经N‑羟基琥珀酰亚胺活化后与氨基化的β‑环糊精通过酰胺键相连接；β‑环糊精与金刚烷功能化的2‑吡啶苯酰胺型有机铱催化剂结构中的金刚烷通过主客体偶联作用相连接。还包括所述催化剂与罗丹明110型醌还原调控荧光探针结合在辅酶NADH检测中的应用。本发明制备的环糊精仿生有机铱磁性催化剂MBs@CD@Ir具有优异的生物相容性，所构建的NADH荧光探针具有灵敏度高、选择性好以及催化剂易于回收的优点。