本发明公开了一种抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA,并公开了其重组过表质粒和具体应用,以及利用过表达miRNAs构建稳定低表达Sirt1基因的LMH细胞系。相对于现有技术,本发明以人工设计的miRNA对目的基因进行干扰,并通过简单的PCR技术直接快速的构建该miRNA的过表达载体,本发明所提供的pLNCX‑pmirG为miRNA进行过表达的一个很好的载体,并能依次进行逆转录病毒的包装,结合G418加压筛选和绿色荧光蛋白检测方法可以快速获得稳定过表达miRNA的细胞系,不仅可以为研究揭示Sirt1基因影响肝脏对营养状态的应答机制,也为研究人类、动物肝脏在能量代谢中的功能提供一个独特的肝细胞亚克隆系模型。
📄 2018111187113
📂 C12N15_113
👤 常熟理工学院
📅 2018-09-26