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本发明涉及一种高效生产尼罗罗非鱼高繁殖率YY转化雌鱼的方法，先将XY转化雌鱼与XY的雄鱼或YY超雄鱼交配，其后代在授精后5天开始同时用雌激素和雄激素合成酶抑制剂浸浴至授精后10天幼鱼开口；然后在幼鱼开口后投喂高剂量激素添加饲料进行雌性化处理3个月，用Y染色体特异分子标记筛选出性染色体基因型为YY的转化雌鱼正常饲料饲养到6月龄；接着在6～7月龄用低剂量激素添加饲料处理YY转化雌鱼，正常饲养到性成熟；最后筛选出可育YY转化雌鱼。可育YY转化雌鱼和YY超雄鱼交配建立YY维持系并实现遗传全雄鱼鱼苗的规模化生产，显著提高养殖产量，降低养殖成本，减少激素的使用，在罗非鱼入侵泛滥的地区可以大量投放YY超雄鱼进行生物防治。