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本发明属于中药材栽培技术领域，具体涉及一种松节油在茯苓栽培中的应用以及苓菌栽培方法与组合物。该组合物由木屑、松节油和辅料按质量比56：0.1：44组成。辅料由棉籽壳、石膏、蔗糖和玉米粉按质量比40：1：1：2组成。本发明研究证实，松节油可以替代松木进行茯苓袋料栽培，其通过影响茯苓菌丝中营养利用及生物质合成相关基因、AMPK与MAPK信号通路相关基因的表达、参与次生代谢物质转运和氧化应激影响茯苓菌丝生长发育，从而影响菌核的形成。因此，使用在木屑中添加松节油替代松木栽培茯苓菌核，可以实现松木资源的保护，突破松木对茯苓菌核栽培限制。本发明为茯苓栽培提供一种新的方向和手段，对茯苓栽培具有重要意义。