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本发明公开了氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的肺炎克雷伯菌噬菌体裂解酶，本发明从肺炎克雷伯菌噬菌体DP上克隆得到该裂解酶编码基因，采用原核表达方式，诱导表达可溶解的裂解酶，所得裂解酶重组蛋白可以在无外膜渗透剂的情况下穿过革兰氏阴性菌的细胞外膜，水解细菌细胞壁肽聚糖层，对革兰氏阴性菌例如铜绿假单胞菌和大肠杆菌表现出强烈的抑菌活性，可用于制备抗革兰氏阴性菌的药物，为治疗和抑制革兰氏阴性菌疾病提供有力支持；此外，该裂解酶的制备方法简单，适于工业化大规模生产。

本发明提供了一种抗大肠杆菌噬菌体表达的内溶酶和穿孔素组合物及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域。所述内溶酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述穿孔素的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的噬菌体表达的内溶酶Lys 9和穿孔素Hol 9，具有广谱的杀菌活性，对多种革兰氏阳性和革兰氏阴性菌都具有较好的抑菌效果，对大肠杆菌具有明显的杀伤作用，且内溶酶Lys 9具有一个N端酶活结构域，能裂解β‑1,4‑糖苷键，穿孔素Hol 9具有一个保守的结构域，能破坏细胞，并传递信息来控制细胞的裂解时间，可用于制备预防、抑制或治疗细胞感染的药物中，在医疗和食品安全领域具有推广应用价值。