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本申请属于蛋白质与生物技术领域，公开了一种人工金属酶及其制备方法与应用。本发明以肌红蛋白为蛋白质分子设计骨架，在活性中心血红素周围引入谷氨酸，加入MgII离子，形成金属离子-蛋白质复合物MgII-L29E Mb，构建了一种新型的人工金属酶。本发明所述MgII-L29E Mb复合物能连续水解DNA分子中的磷酸二酯键，最终降解DNA分子，从而类似于天然核酸外切酶性质，具有DNA外切酶活性，能快速降解DNA分子，最终实现DNA完全降解。降解的DNA底物分子具有广谱性，包括线性DNA或环状DNA分子。而且，这一催化活性是野生型Mb或单独L29E Mb蛋白以及MnII(或CoII)-L29E Mb复合物所不具有的。

本发明涉及蛋白质与生物技术领域，尤其涉及一种基于金属离子‑肌红蛋白突变体复合物的人工金属水解酶的制备及应用。本发明以肌红蛋白为蛋白质分子设计骨架，在活性中心血红素周围引入谷氨酸，加入MnⅡ或CoⅡ离子，形成金属离子‑蛋白质复合物，构建具有催化功能的人工金属酶，即一种新型的人工金属水解酶。本发明中的L29E Mb+MnII(或CoII)金属蛋白酶与文献报道的野生型Mb或单独L29E Mb蛋白相比，对DNA具有更好的水解断裂能力，催化效率大大提高，而且催化功能不受空气中O2的干扰。