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本公开提供了一种检测非洲猪瘟病毒MGF‑505‑1R基因的PCR引物，选自以下两对引物中的任意一对：引物1：由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成；引物2：由SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的核苷酸序列组成。本公开还提供了一种检测非洲猪瘟病毒MGF‑505‑1R基因的试剂盒，包括：PCR混合液、酶混合液、阴性对照及阳性对照，所述PCR混合液包括引物，所述引物为上述引物1或引物2。本公开提供的试剂盒，扩增效率高，检测灵敏度、特异性高，可用于猪的唾液、鼻腔拭子、血液、组织等样本中的非洲猪瘟病毒MGF‑505‑1R基因检测。