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本发明属于细胞生物学的技术领域，本发明提供了一种体外胶质疤痕形成模型的构建方法，包括将纯化后的脑(脊)膜纤维细胞和星形胶质细胞以一定的数量比分别种植于腔室载玻片上相邻的小室内，添加培养基进行培养；当细胞贴壁生长后，再将小室间的隔板移除，继续培养；当观察到脑(脊)膜纤维细胞和星形胶质细胞这两种细胞生长并相互靠拢时，用锐器在两种细胞交界处作机械划痕损伤细胞，最终形成类胶质疤痕的结构。本发明获得的体外胶质疤痕形成模型能够较好地模拟体内胶质疤痕形成的整个过程，并出现相应的胶质疤痕形态结构及相关细胞生物学与分子生物学的变化，为胶质疤痕形成的机制研究及相关治疗研究提供体外细胞水平的实验模型。