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本实用新型公开了一种干细胞冷冻保存设备，涉及干细胞冷冻技术领域，包括罐体，所述罐体顶端安装有密封盖，所述罐体内部设置有放置筒，所述放置筒一侧开设有开口，所述开口出滑动连接有密封板，所述密封板一侧固定连接有滑杆，所述密封板通过滑杆与放置筒滑动连接，所述放置筒一侧开设有与其配合的滑槽。本实用新型通过设置密封盖、密封板和可调节的压板结构，有效实现干细胞储存过程中的全程密封，避免了冷藏气体在操作过程中泄漏，提升了操作安全性，防止冷气与操作者直接接触，减少冻伤风险，利用压板与弹性片联动挤压放置筒内部残余气体，并将其回流至罐体内部，形成气体循环再利用机制，降低了气体消耗率，提高了气体使用效率。

本发明属于胶质瘤技术，具体涉及一种应用CRISPR/Cas9和split GFP双分子荧光互补技术标记胶质瘤干细胞标志物LGR5的方法及试剂盒，克服因缺乏高特异性的抗体，使得现有方法无法准确检测LGR5在GSCs中的内源蛋白表达水平的难题。本发明巧妙的应用CRISPR/Cas9技术用较小的亚基GFP11标记LGR5蛋白，同时构建稳定表达较大亚基GFP1‑10蛋白的GSCs。当两个片段在同一细胞内，这两个部分能够稳定地相互作用，产生具有发光功能的GFP，从而可检测胶质瘤干细胞中的LGR5内源表达水平。其检测方法稳定性好，便于推广。