专利交易市场

本发明涉及一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法，所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经缓冲液悬浮，制成菌悬液；向菌悬液中添加改性硅藻土，搅拌混匀，加入聚乙烯亚胺，然后再加入戊二醛进行交联，15～35℃搅拌交联0.5～5h后抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤后，粉碎成粒，得到含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶制剂；本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低，操作简单，机械强度高，制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于催化D‑葡萄糖生产D‑果糖，在60℃条件下，分批次反应重复使用40批次后，仍具有86％以上的残余酶活力；连续反应603h，时空产率为3.8kg/L/d，平均转化率大于42％，具有良好的工业化应用前景。

本发明公开了一种磁性固定化脂肪酶及在拆分1‑甲基‑3‑苯丙胺制备(R)‑(+)‑N‑乙酰基‑1‑甲基‑3‑苯丙胺中的应用，本发明采用二硫化碳代替戊二醛，在磁性颗粒表面引入了二硫代氨基甲酸酯与脂肪酶进行共价结合，本发明制备磁性固定化脂肪酶的方法简单安全，明显优于戊二醛交联的酶固定化方法。同时，本发明将磁性固定化脂肪酶应用于交变磁场中催化不对称酰化反应实现连续化制备(R)‑(+)‑N‑乙酰基‑1‑甲基‑3‑苯丙胺。本发明方法简单、安全有效、易于分离；拆分1‑甲基‑3‑苯丙胺获得R‑构型产物的对映体过剩值达到了98.5％，拆分效果优越。

本发明属于固定化酶技术领域，具体涉及一种固定化酶材料及其制备方法和应用，该固定化酶材料包括：脂肪酶载体；锚定在脂肪酶载体表面的膜骨架结构，所述膜骨架结构为多聚电解质纳米膜；以及固定在膜骨架结构上的脂肪酶。本发明首先制备核壳式微球，并使得壳聚糖和聚丙烯酰胺形成了包封石蜡的纳米膜，而脂肪酶则在纳米膜包封下被固定于石蜡微球的核壳式结构中，通过这种方式既实现了酶的固定化，又避免了其他共价交联的方式带来的酶失活问题；制备的固定化酶材料其亲脂性高，有利于增强脂肪酶和地沟油的接触，而其表面的多聚电解质膜具有负载水膜能力，在油脂界面上保持脂肪酶不易脱落、流失、失活。

本发明公开了一种固定化酶溢油降解剂，固定化酶溢油降解剂中高粱秸秆活性炭所占质量百分比浓度为1.5‑2.2%，海藻酸钠所占质量百分比浓度为6.8‑7.9%，复合酶浓度为6×106‑8×106cell/g，固定化酶溢油降解剂可工作环境的盐度为5‑55‰，温度为10‑30℃，pH为6.5‑9.0，对石油烃的降解率可达70‑90%，其制备方法包括：酶液制备、磷酸活化、蒸汽活化、吸附、交联。有益效果为：固定化酶溢油降解剂对环境的耐受性、机械性较强，高粱秸秆活性炭大幅度提高了固定化酶溢油降解剂的传质性，使酶液与石油接触面积增大，极大的提高了微生物的活性及降解效率。