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一种测定钴浓度的试纸及测定方法，质量检测及环境监测技术领域；所述试纸负载的试剂组成质量分数为：0.5％～5％ETDA、0.05％～1％烷基硫酸钠、0.05％～0.4％紫脲酸铵；制备方法：1)配置氨‑氯化铵缓冲溶液；2)配置浸泡液；3)滤纸或滤纸条按顺序浸泡于浸泡液中，烘干后得到测定钴浓度的试纸；4)将试纸插入标准溶液中，根据线性关系绘制测钴浓度的标尺；测试方法：将试纸插入待测液中，测量试纸的变色高度，参照测钴的标尺或对比参数表查找对应钴浓度；本发明只需要用所制的标尺测量变色带的长度即可反映待测物浓度，克服了传统试纸的缺点，相比而言具有更高的准确度，相对标准偏差RSD在10％以内。