专利交易市场

本发明公开了一种重组腈水解酶及其在医药化学品合成中的应用，所述重组腈水解酶是在腈水解酶氨基酸序列的N端连接多肽标签；所述多肽标签两端位置均为不带电的甘氨酸G，其余为甘氨酸G、组氨酸H、谷氨酸E、天冬氨酸D、赖氨酸K、精氨酸R中任意一种或多种的随机组合。本发明重组腈水解酶制备1‑氰基环己基乙酸时活力高达3034.7U/g dcw，多肽标签的引入显著提高了腈水解酶的可溶性表达，相同浓度全细胞催化剂水解1M底物时较母本酶快30min完成，且稳定性优于母本酶。本发明重组腈水解酶还能够催化合成其它医药中间体，并提高反应中全细胞催化剂的活力，提高其它不同种类腈水解酶的可溶性，以及相应的全细胞催化剂的活力。

本发明公开了重组表达具有明胶酶活性p37k蛋白酶的方法及其提高p37k蛋白性能的方法，本发明通过Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统表达得到约40kD的重组蛋白，然后激活后获得分子量约为25kDa的p37k蛋白酶，25kDa的p37k蛋白酶具有明胶酶活性，但是重组表达的p37k蛋白酶的对热敏感，研究发现在p37k蛋白酶加入中肠提取物和金属离子能够提高重组表达的p37k蛋白酶的热稳定性，并且，加入E64能够提高重组表达的p37k明胶水解活性。因此，中肠提取物和金属离子能够作为p37k蛋白酶的热稳定性保护剂，E64能够作为p37k明胶水解活性的增强剂，为进一步拓展p37k蛋白酶条件提供了基础。

本发明提供了一种牛赤羽病病毒重组N蛋白抗原及制备方法和ELISA试剂盒，涉及生物技术检测领域，解决了现有技术中的ELISA检测方法一般采用的是竞争性ELISA技术手段，其制备成本较高，商品化试剂盒的价格也比较昂贵，对我国肉牛养殖企业发展不利的技术问题。所述牛赤羽病病毒重组N蛋白抗原，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示。本发明中获得的牛赤羽病病毒重组N蛋白抗原，经验证可与牛赤羽病病毒的抗体特异性结合，可作为牛赤羽病病毒检测的候选抗原；本发明研制的ELISA检测试剂盒可用于牛赤羽病病毒抗体的检测，具有特异性强、灵敏度高、重复性好、成本低廉，可大批量检测等优点。