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本申请涉及厌氧菌培育技术领域，且公开了一种厌氧菌培育盒，本方案包括底托，所述底托的顶侧适配放置有密封罩，所述密封罩的顶侧开设有柱状槽，所述柱状槽的内壁上下滑动连接有密封块，所述密封块与柱状槽的内壁相贴合，所述柱状槽的左右两侧均固定连通有L型管，本申请中通过设置密封块和L型管，培养皿在对厌氧菌进行培育时需要定期添加营养液，在添加营养液时，将外设营养液的注管挤压密封块，随着密封块的逐渐向下移动，此时外设营养液的注管会与两个L型管相连通，营养液会顺着L型管进入喷板的内部并且滴落至培养皿内，从而可以在密封环境下完成营养液的添加，避免氧气进入造成厌氧菌菌丝污染，从而确保了厌氧菌的正常生长。