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本发明脂多糖诱导的Caco‑2/RAW264.7细胞共培养模型的建立方法及应用，包括：1）Caco‑2细胞和RAW264.7细胞的培养；2）将Caco‑2细胞接种于Transwell板上室的AP侧，孵化；3）RAW 264.7细胞接种于24孔板，孵化；4）将Transwell上室转移到24孔板；5）将脂多糖溶于PBS中，配制母液，过滤后稀释备用；6）在BL侧加入LPS‑10%DMEM培养基孵化，形成肠道炎症模型。本发明建立了肠上皮细胞系Caco‑2和巨噬细胞系RAW‑264.7细胞的体外模型，以建立肠道炎症反应，用以研究巨噬细胞介导的Caco‑2细胞对C3G纳米脂质体的吸收机制。

本发明提供了一种真皮乳头细胞铁死亡模型的构建方法，属于体外细胞模型构建技术领域。本发明将真皮乳头细胞在含有终浓度为7.8～8.2mM柠檬酸铁铵的培养基中孵育14～18h，得到真皮乳头细胞铁死亡模型。本发明所述方法可成功构建得到大鼠真皮乳头细胞铁死亡模型，满足真皮乳头细胞不同传代细胞铁死亡模型的构建，为铁死亡或铁死亡相关药物的研究提供了基础。

本发明公开了一种基于1H NMR代谢组学方法分析IC50剂量δ‑生育酚对RAW264.7和K562细胞的影响方法，包括以下方法：(1)确定δ‑生育酚对RAW264.7或K562细胞的IC50剂量；(2)细胞萃取液的制备；(3)核磁共振预处理；(4)1H核磁共振检测；(5)差异性代谢物的筛选；(6)代谢通路分析。本发明应用氢谱核磁共振技术结合代谢组学方法，研究了不同细胞差异性代谢物以及代谢通路的影响，提供了一种研究δ‑生育酚对RAW264.7或K562细胞的亚毒性的分析方法。

本发明提供了辛酰化Ghrelin在体外促进牛卵母细胞卵丘细胞复合体雌二醇和孕酮分泌中的应用，进而可体外抑制牛卵母细胞减数分裂。通过辛酰化Ghrelin体外培养抑制牛卵母细胞减数分裂的恢复，从而使得卵母细胞核和细胞质同步成熟，进而提高了牛卵母细胞的质量以及体外发育能力。能够成为新型的减数分裂制剂药物在畜牧业生产上推广应用，具有良好的市场效应和社会效应。