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本发明提供了一种用于可视化检测土霉素的有机硅纳米点比率荧光探针(OSiNDs)及制备方法。有机硅纳米点能够在较广pH溶液中稳定存在，且在长时间紫外照射下释放稳定的荧光。本发明中比率荧光探针的检测机制包含两部分，有机硅纳米点(OSiNDs)基于自身的荧光猝灭机制用于检测四环素类抗生素，通过探针与土霉素(OTC)作用改变并增强土霉素自身荧光将土霉素与其他四环素类区分开来，能够通过比率荧光方法应用于OTC的痕量检测。本发明中比率荧光探针无需后处理加入昂贵的稀土金属或其他荧光材料作为参比，过程简单，条件温和、耗时短。

本发明涉及光学成像领域，具体涉及一种基于咔唑的生物硫醇近红外比率荧光探针的制备方法及其应用。上述近红外比率荧光探针的制备方法为(E)‑9‑乙基‑3‑(2‑(喹啉‑4‑基)乙烯基)‑9H‑咔唑与7‑(溴甲基)‑3,3a‑二氢环戊[b]色满环‑1(2H)‑酮在乙腈中反应生成(E)‑4‑(2‑(9‑乙基‑9H‑咔唑‑3‑基)乙烯基)‑1‑((1‑氧代‑1,2,3,3a‑四氢环戊[b]色满环‑7‑基)甲基)喹啉‑1‑溴化铵。该荧光探针不仅合成路线简单，可操作性强，原料易得，成本较低，而且能快速检测活细胞中生物硫醇，具有灵敏度高，选择性好和斯托克斯位移大；此外，它还可以靶向定位于线粒体。

本发明公开了一种检测次氯酸的比率荧光探针及其制备方法与使用方法。本发明得到的探针本身具有良好的ICT效应而存在较弱的浅橙色荧光，但当存在少量次氯酸的条件下，次氯酸与硫缩酮反应生成乙酰基，此时橙色荧光减弱，而当体系中的次氯酸的浓度进一步增加时，次氯酸可与探针分子吩噻嗪上的硫原子发生氧化反应生成亚砜，进一步阻断了分子的ICT效应，探针分子发射出强的青蓝色荧光，通过上述逐级氧化的设计方案，获得了对次氯酸更宽的、更灵敏的“比率”型的荧光响应，实现了对次氯酸的高灵敏、特异性检测。本发明能够实现对样品内微量次氯酸的灵敏、定量检测，具有操作简便，成本低廉，响应灵敏，易于推广和应用等优点。