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本发明涉及一种多功能超灵敏Zn2+双光子检测荧光分子探针的制备方法及应用。首先，由2,4‑二羟基苯甲醛、戊烯二酸二乙酯和无水哌啶在乙醇中反应制得产物1，产物1与乙酸酐在无水吡啶中反应得产物2，产物2与四氧化锇、高碘酸钠在四氢呋喃反应得产物3，产物3与无水碳酸钾在甲醇中反应得产物4；最后，将产物4溶解于乙醇中，加入二肼吡啶、冰乙酸回流，重结晶等步骤，即得多功能超灵敏Zn2+双光子检测荧光分子探针。适用于生物样本中Zn2+的定性、定量分析，检测灵敏、准确、快捷；可应用于分析化学、生命有机分析化学、疾病预诊及医学临床检测等相关领域。

本发明涉及荧光探针检测技术领域，特别涉及一种用于检测生物细胞粘度的近红外荧光分子探针及其制备方法和应用。以9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4(4-甲硫基苯亚甲基)-1,2,3,4-四氢蒽为荧光基团，以活化的双键为反应活性基团，该分子探针优选为9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4-[4-(甲基哌嗪)-1苯亚甲基]-1,2,3,4-四氢蒽。本发明制备得到的分子探针可应用于生物样本检测，通过扭转分子内电荷转移机制，分子探针在生物样本成像中背景荧光小，发射波长长，近红外发光，感光度极好，由于背景荧光的减少和对生物样品的光损伤小以及穿透深度的增加，使分子探针适合生物细胞内成像。

本发明涉及荧光分子探针检测技术领域，特别涉及一种对生物细胞粘度响应的Turn‑on型荧光分子探针及其制备方法和应用。2‑2‑2‑氯‑3‑(1,3‑二氢‑3,3‑二甲基‑1‑丙基‑2‑氢‑吲哚‑2‑亚基)亚乙基‑1‑环己烯‑1‑基乙烯基‑3,3‑二甲基‑1‑丙基吲哚鎓氯化物和四氮唑为反应原料，得到2‑[2‑(2‑氯环己酮)]‑3,3‑二甲基‑1‑盐酸氯胍‑3‑氢‑吲哚为荧光基团。本发明基于分子的旋转，扭转分子内电荷转移机制，对生物细胞内粘度敏感，通过提高荧光强度或者延长荧光寿命来响应增加的粘度，具有良好的荧光寿命和对粘度变化的高灵敏性，发射波长在红光部分，有较小的荧光背景干扰。

本发明涉及细胞极性与癌症监测技术领域，尤其涉及一种对生物体活细胞极性响应的Turn‑on型荧光分子探针及其制备方法和应用，所述探针的化学结构式如式1所示：本发明的荧光分子探针的发射波长在近红外区域，有较小的荧光背景干扰，其对生物体活细胞极性响应灵敏，可以在数秒内完成，在含有0～100％乙二醇的乙二醇/水极性溶剂中，这种荧光分子探针的荧光强度出现6.2倍的强度变化，表现出双荧光发射峰增强现象，便于疾病的及时发现和早期诊断。同时，这种荧光探针的长波长在近红外部分，对生物活体危害较小。

本发明属于分析化学领域，所述用于检测谷胱甘肽巯基转移酶荧光分子探针采用以下步骤制备：将2,3,3‑三甲基‑3H‑苯并吲哚和碘乙烷溶解在无水乙腈中反应得产物1；将无水N，N‑二甲基甲酰胺和无水二氯甲烷混合，滴加三氯氧磷与无水二氯甲烷，加环己酮，倒入冰中收集得产物2；产物1和产物2溶解在正丁醇和苯溶液中得产物3；将产物3，甲胺盐酸盐和三乙胺溶解在无水N，N‑二甲基甲酰胺中，得产物4；将3,4‑二硝基苯甲酸、三光气溶于无水二氯甲烷中混合，加N，N‑二异丙基乙胺反应，将得到的残余物溶于无水二氯甲烷中，加入N，N‑二异丙基乙胺和4‑二甲氨基吡啶，将产物4溶解在二氯甲烷中并加入上述混合物，得所述分子探针。