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本发明公开了一种含有金属硫蛋白的固定化小球，制备方法为：(1)培养表达金属硫蛋白的菌；(2)将培养液或菌体用PBS缓冲液悬起，反复冻融三次以上，超声破碎得破碎菌液；(3)将破碎菌液、二氧化硅加入到海藻酸钠‑聚乙烯醇水溶液中，得混合液；(4)将混合液滴加到硼酸‑氯化钡水溶液中，4℃固定4h，即得。本发明的含有金属硫蛋白的固定化小球，球体中含有大量细胞碎片、蛋白质等，重金属离子吸附位点多，有利于吸附位点与重金属离子的接触与结合，具有较好的吸附性能，可用于处理含有重金属的废水；具有良好的机械强度，具有良好的重复利用性，且不会造成二次污染；本发明的技术在重金属废水处理中具有重要的应用价值。