专利交易市场

本发明公开了一种多功能磁性DNA纳米球，所述多功能磁性DNA纳米球包括：结合有磁珠的DNA纳米球和/或含双硫键的结合磁珠的DNA纳米球。本发明通过一条磷酸化的线性DNA模板单链和一条DNA引物单链即可完成纳米球的组装；在组装纳米球的过程中，通过对另一条DNA引物单链进行不同的修饰以及对磷酸化的线性DNA模板单链进行结构设计，可以在纳米球结构中组装多种功能基团。本发明的多功能磁性DNA纳米球可以作为靶向运输的药物载体，而且易于实现生物分离；将制备多功能磁性DNA纳米球的DNA引物单链用双硫键进行修饰，还可实现对细胞内巯基化合物的检测。

本发明涉及miRNA检测技术领域，具体涉及一种D‑A‑D型FRET DNA纳米机器及其制备方法和应用，使用四条退火后的发夹DNA依次修饰DNA四面体，得到D‑A‑D型FRET DNA纳米机器，四条发夹DNA分别为HMg、H1‑FAM、H2‑TAMRA和H3‑FAM。本发明基于HMg剪切与催化发夹放大，构建了D‑A‑D型FRET DNA纳米机器，该纳米机器可实现对miRNA的高灵敏检测和原位荧光成像，增强了荧光FRET效率，提高了检测灵敏度，解决了发夹DNA细胞膜穿透性和生物稳定性差的技术问题。

本发明公开了一种端粒酶触发DNA纳米机器及其构建方法，其包括金纳米粒子、探针机械臂序列S1、端粒酶引物序列S2、ATP适体序列S3、反义DNA序列S4，探针机械臂序列S1 5'端的巯基连接在金纳米粒子上，探针机械臂序列S1靠近3'端的部分序列形成环状结构，端粒酶引物序列S2与探针机械臂序列S1互补杂交形成茎‑环结构，ATP适体序列S3 3'端的巯基连接在金纳米粒子上，反义DNA序列S4与ATP适体序列S3互补杂交，所述反义DNA序列S4的3'端修饰光敏剂，所述ATP适体序列S3 5'端修饰双模式成像基团。以肿瘤细胞内的端粒酶触发DNA纳米机器，高丰度的ATP作为驱动，释放反义DNA及光敏剂，实现肿瘤细胞基因治疗、光动力治疗联合治疗、端粒酶的检测及肿瘤细胞的双模式成像。

本发明公开了一种“Y型”多功能DNA纳米组装体、制备方法及其应用，该多功能DNA纳米组装体由四条DNA杂交形成“Y型”结构，包括链ab，链cb*，链d，以及链e；且链d与链ab的部分序列互补，链e与链cb*的部分序列互补，链ab和链cb*上均修饰有细胞膜锚定基团，链d上带有邻硝基苄基光切割基团。制备方法包括步骤：S1.合成ab序列；S2.合成cb*序列；S3.合成d序列；S4.合成序e序列；S5.将四条DNA序列混合加热退火杂交。该多功能DNA纳米组装体能快速地锚定在细胞膜表面，实现对细胞膜表面的c‑Met受体功能的高效光控调控，实现对c‑Met受体抑制效果的实时监测。

本专利公开了一种基于DNA网状结构灵敏检测miRNA的方法，涉及生物传感领域。通过设计结构可切换的哑铃型探针，提高了目标识别的特异性，同时又使得滚环扩增产物具有串联重复茎环结构的特点；滚环扩增产物与修饰DNA-AuNPs杂交形成DNA网状结构，使得AuNPs发生聚集，利用动态光散射技术对AuNPs尺寸进行测量，从而实现miRNA的检测。本发明灵敏度高、特异性好。

本申请提供一种外切酶III驱动的三维DNA纳米机器及其应用，所述三维DNA纳米机器，包括信号探针@纳米金结构和检测探针，信号探针中包含信号探针序列和荧光分子，检测探针中包含半胱天冬酶的识别位点和DNA触发链，DNA触发链与信号探针序列互补；检测探针在半胱天冬酶存在下裂解释放出包含DNA触发链的结构，该结构中的DNA触发链与信号探针杂交形成双链DNA，双链DNA可被外切酶III识别并消化，释放出信号探针中的荧光分子，DNA触发链随即恢复单链并继续与其他信号探针杂交，从而实现荧光分子的循环释放。本发明可实现对多种半胱天冬酶活性的的同时检测，且检测灵敏度高，而且还可用于对半胱天冬酶抑制剂的筛选。

本发明公开了基于DNA五角星纳米材料荧光成像监测乳腺癌细胞中mRNA的方法，其特征是，包括如下步骤，S1、DNA五角星纳米材料合成，S2、荧光检测MMP mRNA的含量，S3、荧光检测FN mRNA的含量；S4、细胞成像。本案使用荧光成像监测乳腺癌细胞中mRNA，具有检测灵敏度高、检测选择性高和直观性强的优点，能更加准确的检测出乳腺癌细胞中的肿瘤标志物mRNA，为肿瘤病人病灶的早期诊断提供帮助。

本发明公开了基于随机G4串联体的智能逻辑门构建及应用，具体步骤如下：取DNA溶液滴涂于Au表面，在4℃冰箱孵育过夜；将蒸馏水、5×TdT缓冲液、dNTP(dTTP+dGTP或者dATP+dGTP)、TdT，混合均匀，滴于DNA/Au表面；聚合反应后，再加入缓冲液(Tris-HCl，KCl，pH 7.4)，向上述电极上滴加hemin，室温放置0.3～1h。以上每一步制备电极后，用蒸馏水缓缓冲洗电极以除去杂质。成功制备传感器，一方面，实现了TdT活性检测和H2O2浓度检测，另一方面，基于TdT、H2O2、dATP、dTTP和dGTP的五种逻辑门(YES、OR、AND)成功设计，在TdT和H2O2相关的生物分析以及疾病诊断方面具有广阔的应用前景。优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低。