本发明公开了一种交联酶聚体的制备方法,所述为:将酶水溶液调节pH至2.5-4.5,加入丙酮或乙醇,搅拌均匀后,室温静置1-3h,排出酶水溶液与丙酮或乙醇总体积50-70%的上清液后,在60-100转/分钟搅拌下加入磷酸盐水溶液,继续搅拌20-40分钟,室温静置1.5-3.5小时,过滤,滤液与排出的上清液合并后蒸馏回收丙酮或乙醇;滤饼用去离子水洗涤,然后真空干燥,得到交联酶聚体;本发明方法制备得到的交联酶聚体酶活回收率达到94.3-97.6%,比现有方法提高27-36%;在45℃水中90分钟,酶活力保持率达到84.3-88.7%,比游离酶酶活力保持率提高126.6-158.6%。
📄 2018116181166
📂 C12N11_00
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-28
本发明公开了一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,所述方法将二甲基咪唑水溶液、硝酸锌水溶液与南极假丝酵母脂肪酶B混合,在25℃、200rpm磁力搅拌条件下反应30min,再加入非极性大孔吸附树脂和交联剂,在15-45℃、200rpm水浴条件下交联反应5h,真空抽滤机抽滤,滤饼干燥,获得固定化南极假丝酵母脂肪酶B;与市场上的现有商品固定化脂肪酶相比较,本发明制备的固定化脂肪酶有更高的酶活力,因此酶固定化方法具有良好的工业化应用前景。
📄 2019104405368
📂 C12N11_14
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-24
本发明公开了一种固定化腈基水合酶的制备方法及其催化制备(S)‑N‑乙基吡咯烷‑2‑甲酰胺的方法。首先采用碳纳米管经过羧基化、酰氯化后与多糖进行反应,制备多糖修饰的碳纳米管复合材料,再通过吸附作用固定化腈基水合酶,制备出高活力可回收利用的固定化腈基水合酶。本发明利用固定化腈基水合酶为催化剂,对底物2‑氰基‑N‑乙基吡咯烷进行酰胺化,获得高收率及高光学活性的产物(S)‑N‑乙基吡咯烷‑2‑甲酰胺。本发明工艺简洁,适用范围广泛,环境污染小,原子利用率高,是一条绿色化工艺。
📄 2018103936172
📂 C12N11_10
👤 浙江工业大学
📅 2018-04-27
本发明公开了一种含重组耐高温葡萄糖异构酶细胞的固定化方法:将含耐高温葡萄糖异构酶基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体用pH值6.5‑7.5的缓冲液制成菌悬液;向菌悬液中添加硅藻土,搅拌混匀,再加入聚乙烯亚胺室温搅拌絮凝1~2h,然后加入三羟甲基磷,在0~30℃、100r/min搅拌交联1~2h后,抽滤,滤饼粉碎,得到所述含耐高温葡萄糖异构酶固定化细胞颗粒;本发明固定化细胞具有优良热稳定性和重复使用率,于90℃保温72h保持70.1%以上,在85℃条件下连续催化D‑葡萄糖生成D‑果糖的15个批次中,转化率均大于50%,并且催化剂仍保留85.8%以上初始酶活。
📄 2017107149330
📂 C12N11_14
👤 浙江工业大学
📅 2017-08-19
本发明公开了一种介孔硅基材料固定碳酸酐酶及其制备方法与应用:所述固定化碳酸酐酶按如下方法制备:将4-10mg/mL碳酸酐酶水溶液加入到6-8mg/mL介孔硅基材料悬浮液中,在25-30℃下搅拌1h,反应结束后,得到反应混合液经离心、洗涤,得到介孔硅基材料固定碳酸酐酶。本发明利用固定化碳酸酐酶颗粒强化促进二氧化碳在碳酸钾溶液中的吸收速率,从而可应用于强化集成真空碳酸盐吸收工艺来捕集烟气中的二氧化碳,在同等条件下提高了二氧化碳吸收速率,吸收速率较纯2wt%碳酸钾溶液提高了1.57倍,显著地提升了经济效益和社会效益。
📄 2019103239017
📂 C12N11_14
👤 浙江工业大学
📅 2019-04-22
本发明涉及一种陶瓷膜表面Janus改性并固定脂肪酶的方法。Janus改性陶瓷膜一面亲水而另一面疏水,而后将脂肪酶固定于Janus改性陶瓷膜的疏水侧。制备步骤包括:一、利用含有氨基硅烷、直链烷基硅烷的乙醇溶液对陶瓷膜整体进行疏水改性,再利用双氧水氧化去除分离层表面的氨基硅烷、直链烷基硅烷,暴露出亲水羟基,得到支撑体侧疏水而分离层侧亲水的Janus改性陶瓷膜;二、在疏水侧表面锚定交联剂,再通过交联剂和脂肪酶的反应,将脂肪酶固定在陶瓷膜疏水侧。本发明具有以下优点:制备方法简单,操作方便;陶瓷膜管壁厚,载酶量大;陶瓷膜酶反应器使用稳定性好;对纯油或水溶性油脂降解效率高。
📄 2019100399283
📂 C12N11_14
👤 重庆理工大学
📅 2019-01-16
本发明属于酶固定化技术领域,具体涉及一种羰基还原酶的固定化方法,具体的为,将大孔树脂置于羰基还原酶溶液中进行吸附固定,所述大孔树脂依次经碱性溶液、乙醇、酸性溶液浸泡活化。该固定化方法操作简单,酶活损失小,稳定性高,适用于机械搅拌或流化床等工业化形式的生产。
📄 2019101160513
📂 C12N11_08
👤 江苏万年长药业有限公司
📅 2019-02-15
本发明公开了一种UCST型温敏性聚合物固定化酶的方法,具体为:首先,将聚丙烯酸类聚合物和引发剂用去离子水溶解,转移到三口烧瓶中,缓慢加入甲基丙烯酸缩水甘油酯,摇匀后通氮气鼓泡半小时后转入单口烧瓶中,氮气保护下抽真空,进行磁力搅拌反应,离心,用丙酮洗涤,烘干,得到固体产物;再将固体产物用缓冲液进行溶解,加入酶,进行恒温震荡反应,再加入胶原及其水解物,恒温震荡,离心,清洗,所得到的沉淀物即为固定酶载体,将固定酶载体置于冰箱冷藏,即可完成固定酶载体的制备。该UCST型温敏性聚合物‑固定化酶体系,能实现液相催化底物,解决传统固定化酶固相催化底物,催化效率低的缺陷。
📄 2021104036568
📂 C08F265_02
👤 陕西科技大学
📅 2021-04-15
本发明提供了一种共固定化酶的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:(1)在海藻酸钠溶液中加入脂肪酶A6、脂肪酶MER和蛋白酶MSD,搅拌均匀后得到共混液;(2)将步骤(1)得到的共混液滴入CaCl2水溶液中,静置固化后形成凝胶颗粒,制得的凝胶颗粒即为所述共固定化酶。采用该方法制备的共固定化酶的固定化率较高,共固定化酶的酶活力操作稳定性和贮藏稳定性均较好。
📄 2016107362619
📂 C12N11_18
👤 仲恺农业工程学院
📅 2016-08-26
本发明属于复合材料技术领域,公开了双层金属有机骨架固定化HRP的制备方法及其应用。本发明先制备Fe‑MIL‑88A,将其依次与HKUST‑1的前体乙酸铜和1,3,5‑苯三甲酸(H3BTC)反应,制得Fe‑MIL‑88A@Cu2+@H3BTC;最后,采用共沉淀法将辣根过氧化物酶(HRP)固定于骨架中,得到复合材料Fe‑MIL‑88A@HRP@HKUST‑1。本发明制备的复合材料具有较强稳定性,在酸性和高温条件下具有较高的催化活性,并且在10次循环后仍保留90%以上的活性。另外,该复合材料中的Fe‑MIL‑88A和HKUST‑1均具有类过氧化物酶活性,将其用于HRP的固定化不仅能提高HRP的稳定性,实现HRP的循环利用,而且可以利用HRP与骨架的耦合实现协同催化作用,进一步提高了复合材料的催化活性。将该复合材料用于废水中有害染料的降解,用量少、时间短、操作简便,具有良好的应用前景。
📄 2019108021475
📂 C12N11_089
👤 江苏大学
📅 2019-08-28
本发明公开了一株用于屎肠球菌谷氨酸脱羧酶高效固定化的基因工程菌及固定化方法。本发明提供了用于屎肠球菌GAD高效固定化的基因工程菌Escherichia coli(DH5α‑LNSF1),该工程菌于2018年9月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其保藏编号为:GDMCC No.60445。使用该基因工程菌可高效生产屎肠球菌GAD固定化酶,其方法为利用改性甲壳素亲和吸附CBM‑GAD融合酶粗酶液,即可获得屎肠球菌GAD固定化酶。该方法使用的改性甲壳素与CBM‑GAD融合酶的亲和性强、结合牢固,得到的GAD固定化酶活力和稳定性高,解决了GAD固定化难、半衰期短、成本高的问题;另外,该固定化方法快捷、效率高,成本大大降低,在高效生产屎肠球菌GAD固定化酶的工业化生产方面具有广泛的应用前景。
📄 2018115595554
📂 C12N1_21
👤 岭南师范学院
📅 2018-12-19