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本发明公开了一种磷光铱配合物及有机无机杂化纳米硅球(MSN‑ONOO)的制备方法与应用，通过共价键将对过氧亚硝酸盐特异性响应的硼酸酯基团接到铱配合物的辅助配体上，通过引入参比配合物实现了比率法的检测，通过制备有机无机杂化纳米硅球，MSN‑ONOO中包覆有两种铱配合物材料(Ir1和Ir3*)，其中Ir1能够对过氧亚硝酸盐特异性响应，Ir3*作为比率探针对过氧亚硝酸盐没有响应。且Ir1磷光强度随过氧亚硝酸盐浓度增大而减弱，磷光寿命随过氧亚硝酸盐浓度增大而减小；能够通过共聚焦成像特异性检测细胞外源性及内源性过氧亚硝酸盐；且通过制备介孔纳米粒子，成功解决了一般荧光/磷光探针水溶性差的缺点。