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本发明涉及一种PCR-ELISA法检测家蚕微孢子虫的试剂盒及其检测方法，其中试剂盒包含核酸分子标记物标记的检测家蚕微孢子虫的引物对和检测所述核酸分子标记物的ELISA试剂；通过以标记的特异性引物对扩增合适的基因片段，再将扩增产物进行ELISA，筛选的引物具有种特异性，且灵敏度高，可以实现多样本的高通量检测，对家蚕成品卵中家蚕微孢子虫检测具有重要意义。

本发明涉及快速检测家蚕微孢子虫的引物对及其试剂盒和检测方法，其引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示，利用该引物对在上、下游引物分别加入不同的核酸分子标记物，标记引物的PCR产物能够直接用免疫金试纸条判定，简化了操作步骤，方便，并且特异性好，灵敏度高，与传统的凝胶电泳相比，其敏感度增加10倍，是一种理想的家蚕成品卵中家蚕微孢子虫的检测手段，具有很好的应用前景。

本发明公开一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法，所述分子标记引物包括序列表SEQ ID NO：1～3所示的上游引物RAA‑Pi1F、下游引物RAA‑Pi1R和Pi‑Probe探针。发明设计的RAA扩增引物与探针经与NCBI的核酸序列数据库进行比对，确定具有物种特异性。本发明检测方法的灵敏度高，扩增时间为20min时，RAA‑LFD的最低检测下限为1×10‑3fg/μL；扩增时间为25min时，RAA‑LFD的最低检测下限为1×10‑4fg/μL，换算成模板分子拷贝数为27.4copies/mL。

本发明公开了一种番茄灰霉病菌LAMP检测引物、检测试剂盒及其应用。其外侧引物对为F3/B3、内侧引物对为FIP/BIP；试剂盒包括LAMP反应混合液、1对外侧引物F3/B3、1对外侧引物FIP/BIP、8 U Bst聚合酶和核酸染料1000×SYBR Green I。通过待测样品DNA提取、环介导等温扩增、显色检测等三步即可检测到是否感染番茄灰霉病菌。本发明根据番茄灰霉病菌ITS序列设计引物，采用LAMP技术进行检测，特异性强、灵敏度高，具有快速、准确性高、灵敏性好、现场应用方便等优点，解决了现有技术中存在的周期长、灵敏度较低、成本高、现场应用困难等缺陷，在番茄灰霉病菌检测方面潜力巨大。

本发明提供了一种苜蓿疫霉菌的巢式PCR检测方法，设计了1对苜蓿疫霉菌的特异性引物PMF/PMR，其序列为：PMF：5'- GTCTACA- GTGGATTTGGATCTCTTG -3'，PMR：5'- CAAAATATAACAGTAAAGTTGAG- TTCG -3'；利用所述引物建立苜蓿疫霉菌的巢式PCR检测方法，本检测方法灵敏度高，灵敏度可达10fg/μl DNA，比常规PCR提高了10000倍，本发明方法操作简单，耗时少，重复性好、特异性强，通量大，可应用于苜蓿草植物组织和土壤中苜蓿疫霉菌的快速、准确检测，对防止苜蓿疫霉菌入侵、病原菌监测及苜蓿草国际贸易往来等方面均具有重要意义。